Определение холестерина в крови и сыворотке: методы исследования

Сыворотка (указанный метод) 0 ‑ 1 год 1.81‑4.53 ммоль/л
до 20 лет 3.10‑5.80 ммоль/л
20 ‑ 29 3.40‑5.80 ммоль/л
30 ‑ 39 3.70‑6.20 ммоль/л
40 ‑ 49 3.70‑6.80 ммоль/л
50 ‑ 59 4.10‑7.30 ммоль/л
60 ‑ 69 4.20‑7.40 ммоль/л

Свободный и эфирносвязанный холестерин окисляется хлорным железом в присутствии уксусной, серной и фосфорной кислот с образованием ненасыщенных продуктов, окрашенных в фиолето‑красный цвет.

Основан на использовании сопряженных ферментативных реакций, катализируемых: 1) холестеролэстеразой, катализируещей гидролиз эфиров холестерина до свободного холестерина; 2) холестеролоксидазой, катализирующей превращение холестерина в холестенон с образованием перекиси водорода; 3) пероксидазой, катализирующей в присутствии фенола окисление перекисью водорода 4‑аминоантипирина с образованием окрашенного продукта розово‑малинового цвета.

Сыворотка
(указанный метод)
20‑29 лет 3,70‑6,51 ммоль/л
30‑39 лет 4,25‑7,04 ммоль/л
40‑49 лет 4,37‑7,70 ммоль/л
старше 50 лет 4,55‑8,24 ммоль/л
Спинномозговая жидкость 0‑0,013 ммоль/л
Слюна 0,065‑0,233 ммоль/л
Желчь печеночная 2,1‑5,4 ммоль/л
пузырная в среднем 11,1 ммоль/л

Завышение результатов при колориметрических методах исследования происходит при высоком содержании в пробе билирубина, гемоглобина, витамина A; при ферментативном методе — оксикортикостероидов и применении антикоагулянтов (фторидов, оксалатов).

Существенное повышение содержания холестерина отмечается при гиперлипопротеинемии IIa типа (семейная гиперхолестеринемия), IIb и III типа (полигенная гиперхолестеринемия, семейная комбинированная гиперлипидемия), умеренное повышение наблюдается при гиперлипопротеинемии I, IV, V типа, а также заболеваниях печени (внутри‑ и внепеченочный холестаз), заболеваниях почек, злокачественных опухолях поджелудочной железы, гипотиреозе, заболеваниях сердечно‑сосудистой системы, беременности, сахарном диабете.

Снижение выявляется при гипертиреозе, циррозе печени, злокачественных опухолях печени, гипопротеинемии и аb‑липопротеинемии.

Накопление холестерина выявляется при менингите, опухоли или абсцессе мозга, кровоизлияниях в мозг, при рассеяном склерозе.

Снижение значений обнаруживается при церебральной и кортикальной атрофии.

Свободный холестерин способен образовывать с дигитонином, томатином, пиридинсульфатом труднорастворимые соединения. Чаще всего применяют водно‑спиртовый или изопропаноловый раствор дигитонина.

Холестерин экстрагируют из сыворотки с помощью изопропилового спирта, экстракт делят на две части, в одной определяют содержание общего холестерина. В другой порции экстракта свободный холестерин осаждают дигитонином, супернатант отбрасывают, а осадок растворяют и определяют содержание свободного холестерина любым методом. Содержание этерифицированного холестерина рассчитывают как разницу между общим и свободным.

Коэффициент этерификации холестерина является важной функциональной пробой печени. Снижение коэффициента пропорционально снижению функции печени: острый и обострения хронического гепатита, механическая желтуха, цирроз печени. Степень этерификации также зависит от активности сывороточного фермента лецитин-холестерин-ацил-трансферазы, поэтому хранение пробы при комнатной температуре может изменить соотношение между свободной и этерифицированной фракцией холестерина.

Разделение α‑ и β‑липопротеинов основано на избирательной способности липопротеинов очень низкой и низкой плотности образовывать нерастворимые комплексы с гепарином в присутствии двухвалентных катионов Mn 2+ . Липопротеины высокой плотности при этом остаются в надосадке, где определяют содержание α‑холестерина любым способом.

Определение α‑холестерина используется для расчета индекса атерогенности:

α‑Холестерин
Сыворотка 0,9‑1,9 ммоль/л
Индекс атерогенности
Сыворотка новорожденные Возрастание концентрации α‑холестерина клинически не значимо, наблюдается при доброкачественных состояниях. Снижение содержания α‑холестерина свидетельствует об угрозе атеросклероза.

Возрастание индекса атерогенности до 4 и более наблюдается при ишемической болезни сердца и атеросклерозе.

источник

Количественное определение холестерина в сыворотке крови.

Принцип:холестерин который содержится в сыв.крови обрабатывается реактивом Лимбермана-Бурхарда(смесь уксусного ангидрида, ледяной уксусной кислоты и концентрированной H2SO4)при этом холестерин теряет воду и превращается в непредельный углеводород, который с уксусным ангидридом образует зеленое окрашивание. Интенсивность полученной окраски определяется на ФЭКе.

Норма: 4-6,5 ммоль/л

Клинико-диагностическое значение: содержание холестерина в сыворотки крови у человека зависит от возрастаю Это связано с уменьшением продукции и секреции в кровь половых гормонов. Содержание холестерина в сыворотке крови у женщин детородного возраста ниже чем у мужчин. Половые различия в уровне этого показателя после 60 лет исчезают. Уровень крови холестерина отражает состояние липидного обмена. Обмен холестерина часто нарушается при различных заболеваниях. Гиперхолестеринемия отмечается при атеросклерозе, гипертонической болезни, ишемической болезни, ишемической болезни сердца, дислипопротеинемиях, сахарном диабете, гипотиреозе, подагре, хроническом алкоголизмеЮ заболеваниях печени, почек. Гиперхолестеринемия является фактором риска коронарного атеросклероза. Гипохолестеринемия возникает при гипертиреозе, голоданиях, синдроме мальабсорбции, поражении ЦНС, заб-ях легких, острой стадии восп.процесса, онкологических заболеваниях.

Количественное определение лецитина в сыворотке крови.

Принцип: Лецитин извлекается из сыворотки крови горячим спиртом;после минерализации в экстракте колориметрическим методом определяется неорганический фосфор,содержащийся в составе лецитина.Количество лецитина определяют по стандартной кривой.

Норма: 1,4-3,35 г/л

Клинико-диагностическое значение: Изменение содержания лецитина в крови зависит от возраста, наблюдается при ряде заболеваний (Атеросклероз, сах.диабет, микседема).

Колличестенное определение протеолитической активности желудочного сока по Ансону.

Принцип:: После инкубации желудочного сока с казеином о протеолитической активности жел. сока судят по уровню образующихся при расщеплении казеина неосаждаемых ТХУ пептидов, количество которых соответствует количеству определяемого в них тирозина (опр.по калибровочному графику).

Формула : А=2С тир(мкМ/мл*мин) Норма = 0,15-0,5мкМ/мл*мин

Клинико диагностич – язвенная болезнь 12-ти перстной кишки (снижается протеолитич активность жел. сока)

8, 9. Определение активности АлАТ(аланинаминотрасфераз) в сыворотке крови

Принцип метода:В результате трансаминирования, происходящего под действием АсАТ и АлАТ, образуются соответственно щавелевоуксусная и пировиноградные кислоты. В процессе другой ферментативной реакции(декарбоксилирования) ЩУК превращается в ПВК. При добавлении кислого 2,4-динитрофенилгидразина энзиматический процесс останавливается и образуется гидразон пировиноградной кислоты. Гидразон в щелочной среде дает окрашивание, интенсивность пропорциональна количеству образовавшейся пировиноградной кислоты и определяется с помощью ФЭКа. Расчет по калибровочному графику, показывающий зависимость оптич плотности от содержания ПВК с учетом времени инкубации..

Норма: АлАТ 0,028-0,196 мкмоль/л*с, АсАТ 0,028-0,139 мкмоль/л*с

Клинико диагностич:Опредление активности аминотрасфераз в сыворотке крови имеет важное значение для диагностики гепатитов. АлАТ повышается весьма рано. При затяжной болезни наблюдается длительная гиперферментемия. При инфаркте миокарда в сыворотке крови увеличивается активность АСаТ>АЛТ. При гепатитах в сыворотке увелич активность АСТ

источник

Холестерин (холестерол) – высший, полициклический, ненасыщенный одноатомный, вторичный спирт.

Большая часть холестерина в крови находится в виде холестеридов – сложных эфиров с высшими жирными кислотами: пальмитиновой, стеариновой или олеиновой. Холестерин и его эфиры нерастворимы в воде и образуют комплексные соединения со специфическими белками, которые являются обязательными компонентами ЛП сыворотки крови и клеточных мембран, влияют на физико-химические свойства плазматической мембраны, регулируют ее проницаемость и влияют на активность интегрированных в нее ферментов. Из холестерина образуются физиологически активные вещества: желчные кислоты, стероидные гормоны и провитамины группы D. Холестерин поступает в организм с пищей, но в основном синтезируется из ацетил-КоА в печени и, частично, в кишечнике. Из печени в ткани он попадает в составе ЛПНП. Избыток холестерина из тканей удаляется ЛПВП в печень. Холестерин – это основной компонент ЛПНП и минорный ЛПОНП и ЛПВП.

На содержание холестерина в сыворотке крови влияют различные факторы: наследственность, питание, состояние эндокринных желез и внутренних органов (печень, почки). Так например, повышение уровня холестерина в сыворотке крови наблюдается при атеросклерозе, семейной гиперхолестеринемии, декомпенсированном сахарном диабете, нефротическом синдроме, хроническом гепатите, гипопротеинемии. Понижение концентрации холестерина происходит при остром гепатите, болезни Гоше, острых инфекциях, кахексии, анемии, остром панкреатите. Исследуется роль холестерина в процессах нейродегенерации и развитии болезни Альцгеймера.

Цель работы

Определить содержание холестерина в сыворотке крови. Сравнить полученное значение с нормой.

Принцип метода

Холестеринэстераза гидролитическим путем расщепляет сложноэфирную связь в эфирах холестерина (холестеридах). Образовавшийся свободный холестерин как спирт окисляется холестериноксидазой до кето-формы холестерина (холестенона) и пероксида водорода. Последний под действием пероксидазы способен окислять фенол при участии 4-аминоантипирина до окрашенного соединения — хинонимина. Оптическую плотность окрашенного раствора хинонимина определяют фотометрически. Расчёт концентрации холестерина проводят по сравнению со стандартным раствором.

Выполнение работы (см. приложение)

Реактивы и этапы Пробы
Опыт Контроль Стандарт
1. Реагент, мл (хромогенная смесь*)
2. Сыворотка крови, мл ** 0,05
3. Н2О, мл 0,05
4. Стандартный раствор холестерина (4,65 ммоль/л), мл 0,05
Инкубируют 10 мин при 25°С
Фотометрируют против Н2О (l = 500 нм, толщина кюветы 3 мм) D500
Dоп — Dк
Dст — Dк

*в состав реагента входят: холестеринэстераза, холестериноксидаза, пероксидаза, 4-аминоантипирин, фенол, фосфатный буфер – рН 6.5.

** При проведении анализа лошадиной сыворотки следует помнить, что содержание холестерина в ней значительно ниже, чем в сыворотке крови человека.

Расчет результатов

С =

• 4,65 ммоль/л

где 4,65 ммоль/л – концентрация холестерина в стандартном растворе.

Норма: 4,4 – 5,5 ммоль/л.

Тестовые задания по теме: «β-Окисление высших жирных кислот и их биосинтез»

1) Ответить на каждый вопрос однозначно: «да» или «нет»

1. В β-окислении жирных кислот участвуют ФАД- и НАД-зависимые дегидрогеназы.

2. Полное окисление одной молекулы пальмитиновой кислоты до СО2 и Н2О сопровождается образованием 130 молекул АТФ.

3. Линоленовая кислота является незаменимой для человека.

4. Для образования мевалоновой кислоты необходим НАДФН (Н + ).

5. Простагландины образуются из полиненасыщенных жирных кислот.

6. Холестерин в сыворотке крови находится только в свободном состоянии.

7. Можно ли заменить НАДФН (Н + ) на НАДН(Н + ).в биосинтезе высших жирных кислот?

8. Участвует ли биотин в биосинтезе жирных кислот?

9. Возможно ли полное превращение нейтральных жиров в углеводы в животном организме?

10. Обратимы ли все стадии β-окисления жирных кислот в митохондриях?

11. Нужны ли витамины В2 и РР для нормального протекания -окисления жирных кислот?

12. Повышается ли с возрастом концентрация холестерина в сыворотке крови человека?

2) Выбрать один правильный ответ

Кофермент, участвующий в биосинтезе жирных кислот, но неучаствующий в их окислении: ФАД НАД НАДФН (Н + ) КоА ТПФ НАДФН (Н + ) для биосинтеза жирных кислот и холестерина поставляется за счет: гликолиза ЦТК β-окисления жирных кислот биологического окисления пентозофосфатного пути

3) Установить последовательность образования метаболитов β-окисления жирных кислот

А. Еноил-КоА Б. Кетоацил-КоА В. Оксиацил-КоА Г. Ацил-КоА Д. Ацетил-КоА

Дата добавления: 2016-10-30 ; просмотров: 1939 | Нарушение авторских прав

источник

При ряде заболеваний внутренних органов уровень ХС плазмы (сыворотки) крови претерпевает как увеличение, так и снижение.

Гиперхолестеринемия— фак­тор риска коронарного атеросклероза. Это подтверждено много­численными эпидемиологическими и клиническими исследова­ниями, установившими связь гиперхолестеринемии с коронар­ным атеросклерозом, частотой клинических проявлений ИБС и инфаркта миокарда.

Самый высокий уровень холестерина отмечается при генети­ческих нарушениях в обмене липопротеинов (ЛП): семейной гомо- и гетерозиготной первичной гиперхолестеринемии, семей­ной комбинированной гиперлипидемии, полигенной гиперхо­лестеринемии. Вторичная гиперхолестеринемия наблюдается при заболеваниях печени, сопровождающихся внутри- и внепеченоч­ным холестазом (обтурационной желтухе), поражениях почек (гломерулонефрите, нефротическом синдроме, хронической по­чечной недостаточности), злокачественных опухолях поджелу­дочной железы и простаты, подагре, гипертонической болезни, эндокринных расстройствах, гипотиреозе, сахарном диабете, хро­ническом алкоголизме, гликогенозе 1 типа, ожирении.

Снижение уровня ХС плазмы — rипохолестеринемия — наблю­дается при голодании, у больных с синдромом мальабсорбции, при поражении ЦНС, умственной отсталости, хронической не­достаточности ССС, кахексии (раковой), гипертиреозе, острых инфекционных заболеваниях, остром панкреатите, острых гнойно­-воспалительных процессах, лихорадочных состояниях, легочном туберкулезе, пневмонии, саркоидозе, бронхите, анемиях, гемоли­тической желтухе, остром гепатите, злокачественных опухолях пе­чени, раке кишечника, ревматизме и некоторых других заболе­ваниях, а также при эффективной гиполипидемической терапии.

Метод определения уровня холестерина липопротеинов высокой плотности (α-холестерина) основан на способности ЛПНП и ЛПОНП в противоположность ЛПВП образовывать нерастворимые комплек­сы с гепарином в присутствие ионов марганца. В надосадочной жидкости определяют содержание холестерина ЛПВП (α -ХС).

Нормальные величины холестерина ЛПВП (α-ХС) равны 0,9- 1,9 ммоль/л.

Коэффициент атерогенности (КА) рассчитывают по следующей формуле:

У здоровых людей в норме он составляет 2-3. Примечания.

1. Кровь для анализа содержания α -ХС берут у обследуемого утром натощак, через 12-14 ч после последнего приема пищи. В течение 2 нед до взятия крови необходимо прекратить использо­вание лекарственных препаратов, влияющих на липидный об­мен. Взятая цельная кровь может храниться при 4 ос не более 3 ч.

2. Для исследования можно применять как сыворотку, так и плазму, полученную с использованием этилендиаминтетрауксус­ной кислоты (ЭДТА) в качестве антикоагулянта (l мг сухой динатриевой соли ЭДТА на 1 мл крови).

Клинико-диагностическое значение α -ХС

Снижение уровня ХС-ЛПВП более четко предсказывает форми­рование ИБС, чем увеличение содержания в плазме (сыворотке) крови общего ХС. Уменьшение концентрации α -ХС всего лишь на 0,13 ммоль/л (с 0,91 ммоль/л до 0,78 ммоль/л) в 3 раза повышает риск заболеваемости ИБС. Значительное уменьшение концентрации α -ХС (до уровня меньше 0,52 ммоль/л) и повышение холестерино­воro коэффициента атерогенности отмечается у лиц с алиментар­ным ожирением, что свидетельствует о риске развития у них ИБС.

Гиподинамия и курение приводят к снижению уровня α -ХС . То же наблюдается при избыточном потреблении сахара. Кон­центрация α -ХС и ЛПВП значительно уменьшается при атеро­склерозе, инфаркте миокарда, сахарном диабете, остром гепати­те, циррозе печени, застойной (обтурационной) желтухе, заболе­ваниях почек, острых бактериальных и вирусных инфекциях. Увеличение концентрации α -ХС отмечено при занятиях физиче­ским трудом (на свежем воздухе), под влиянием эстрогенов, некоторых пестицидов, приема алкоголя.

Триацилглицерины (ТГ) (нейтр жиры) – эфиры трехатомного спирта глицерина и высших жирных кислот. Для их кол опр-ия исп-ют химические и ферментативные (энзимные) методы исследования. Весьма распространены химические методы с колориметрическим и флюориметрическим завершением.

КДЗ: Гипертриацилглицеринемия. Увеличение конц-ии нейтр жиров в крови (до уровня свыше 2,30 ммоль/л) отражает возрастание ур ЛПОНП и ХМ. Для установления содержания ЛПОНП нах-т расч м-дом конц-ю ХС-ЛПОНП: пок-ль конц-ии ТГ (не превыш 3,4 ммоль/л) дел на 2,2, т.к. молярное сод-ие ТГ в лип-ой фазе частиц ЛПОНП превыш в 2,2 раза таковое холестерола. Гипертриацилглицеринемия набл-ся у больных ожирением, хр ИБС, вир гепетитом, алкогольным и билиарным циррозом печени, внепеченочной обтурацией желчных путей, панкреатитами, нефр с., хр поч недостаточностью, гипертонической болезнью, острым инфарктом миокарда, тромбозом сосудов сердца, СД, хр алкоголизмом, подагрой, гликогенозами 1,2,3 типов, бол Дауна, остр перемежающейся порфирией.

Гипотриацилглицеринемия: их ур сниж-ся при гипо- и абеталипопротеинемии, лимфангиэктазии кишечника, терминальной стадии поражения паренхимы печени, ХОБЛ, гипертиреозе, инфаркте мозга, лактозурии, недостаточности питания, синдроме мальабсорбции.

Дата добавления: 2015-04-19 ; просмотров: 2482 . Нарушение авторских прав

источник

Количественное определение холестерина в сыворотке крови по методу Илька.

Принцип метода.Холестерин, содержащийся в сыворотке крови, обрабатывается реактивом Либермана-Бурхарда (смесь уксусного ангидрида, ледяной уксусной кислоты и концентрированной Н2SО4). При этом холестерин теряет воду и превращается в непредельный углеводород, который с уксусным ангидридом образует зеленое окрашивание. Интенсивность полученной окраски определяется на ФЭКе.

Ход работы.В сухую (!) пробирку поместить 2,1 мл реактива Либермана-Бурхарда и осторожно по стенке пробирки добавить 0,1 мл негемолизированной сыворотки крови. Пробирку тотчас же встряхнуть энергичными движениями 8-10 раз и поместить в термостат при температуре 30С на 20-25 минут в темноте. Полученную зеленую окраску колориметрировать на ФЭКе при красном светофильтре против дистиллированной воды в кюветах с толщиной слоя 5 мм.

По найденной экстинкции определить количество холестерина в г/л по стандартной кривой.

Клинико-диагностическое значение определения холестерина в сыворотке (плазме) крови. Содержание холестерина в сыворотке крови у человека зависит от возраста. В сыворотке крови здорового взрослого человека содержится 1,5-2,4 г/л (3,63-5,2 ммоль/л) холестерина, у детей — 1,0-1,3 г/л, юношей — 1,3-1,8 г/л, у людей пожилого возраста выше 2,4 г/л. У мужчин старше 60 лет содержание холестерина в сыворотке крови несколько ниже, чем у мужчин 50-60 лет. Это связано с уменьшением продукции и секреции в кровь половых гормонов. Содержание холестерина сыворотке крови женщин детородного возраста ниже, чем у мужчин; после 60 лет половые различия в уровне этого показателя исчезают.

Уровень крови холестерина отражает состояние липидного обмена. Обмен холестерина часто нарушается при различных заболеваниях.

Гиперхолестеринемия (повышение содержания холестерина в крови) отмечается при атеросклерозе, гипертонической болезни, ишемической болезни сердца, дислипопротеинемиях, сахарном диабете, гипотиреозе, подагре, хроническом алкоголизме, заболеваниях печени, почек и др. Гиперхолестеринемия – наиболее документированный фактор риска коронарного атеросклероза.

Гипохолестеринемия (снижение содержания холестерина в крови) возникает при гипертиреозе, голодании, синдроме мальабсорбции, поражении центральной нервной системы, хронических обструктивных заболеваниях легких, острой стадии воспалительного процесса, дефиците альфа-липопротеинов (болезнь Танжера), онкологических заболеваниях.6. Количественное определение лецитина в сыворотке крови.

Количественное определение содержания лецитина в сыворотке крови.

Принцип метода.Лецитин извлекается из сыворотки крови горячим спиртом; после минерализации в экстракте колориметрическим методом определяется неорганический фосфор, содержащийся в составе лецитинов. Количество лецитина определяется по стандартной кривой.

Ход работы.В пробирку налить 1 мл сыворотки крови и 2,5 мл спирта. Содержимое пробирки перемешать стеклянной палочкой. Пробирку неплотно закрыть резиновой пробкой и поместить на 10 минут в водяную баню при температуре 80С. Параллельно поставить контрольную пробу с 2,5 мл смеси Блюра. Содержимое обеих пробирок охладить, профильтровать через обезжиренный фильтр в сухие пробирки. Для полноты извлечения содержимое пробирки сполоснуть 1-1,5 мл смеси Блюра и вылить на фильтр.

Полученные фильтраты (опыт и контроль) осторожно выпарить, добавить в каждую пробирку по 5 капель концентрированной серной кислоты и сжечь на слабом пламени спиртовки до появления бурой окраски и тяжелых белых паров. Пробирки охладить на воздухе, добавить по 5-6 капель пергидроля и содержимое пробирок вновь сжечь до обесцвечивания жидкости. После охлаждения в каждую пробирку добавить по 2 мл бидистиллированной воды, нейтрализовать содержимое пробирок 6-7 каплями 33% раствора едкого натра, после чего добавить по 2,5 мл ацетатного буфера (рН — 4,0), 0,5 мл 2% раствора молибденовокислого аммония и 1 мл 1% раствора аскорбиновой кислоты. Содержимое пробирок тщательно перемешать и через 10 минут колориметрировать на ФЭКе с красным светофильтром (опыт против контроля). Содержание лецитина в сыворотке крови в г/л рассчитать по калибровочному графику.

Клинико-диагностическое значение определение содержания лецитина в сыворотке крови. Содержание лецитина в сыворотке крови здорового человека зависит от возраста, составляя в среднем 1,5-2,7 г/л. Изменение содержания лецитина в крови наблюдается при ряде заболеваний (атеросклероз, сахарный диабет, микседема и др.).7. Определение протеолитичсской активности аланинаминотрансферазы.

источник

При ряде заболеваний внутренних органов уровень ХС плазмы (сыворотки) крови претерпевает как увеличение, так и снижение.

Гиперхолестеринемия— фак­тор риска коронарного атеросклероза. Это подтверждено много­численными эпидемиологическими и клиническими исследова­ниями, установившими связь гиперхолестеринемии с коронар­ным атеросклерозом, частотой клинических проявлений ИБС и инфаркта миокарда.

Самый высокий уровень холестерина отмечается при генети­ческих нарушениях в обмене липопротеинов (ЛП): семейной гомо- и гетерозиготной первичной гиперхолестеринемии, семей­ной комбинированной гиперлипидемии, полигенной гиперхо­лестеринемии. Вторичная гиперхолестеринемия наблюдается при заболеваниях печени, сопровождающихся внутри- и внепеченоч­ным холестазом (обтурационной желтухе), поражениях почек (гломерулонефрите, нефротическом синдроме, хронической по­чечной недостаточности), злокачественных опухолях поджелу­дочной железы и простаты, подагре, гипертонической болезни, эндокринных расстройствах, гипотиреозе, сахарном диабете, хро­ническом алкоголизме, гликогенозе 1 типа, ожирении.

Снижение уровня ХС плазмы — rипохолестеринемия — наблю­дается при голодании, у больных с синдромом мальабсорбции, при поражении ЦНС, умственной отсталости, хронической не­достаточности ССС, кахексии (раковой), гипертиреозе, острых инфекционных заболеваниях, остром панкреатите, острых гнойно­-воспалительных процессах, лихорадочных состояниях, легочном туберкулезе, пневмонии, саркоидозе, бронхите, анемиях, гемоли­тической желтухе, остром гепатите, злокачественных опухолях пе­чени, раке кишечника, ревматизме и некоторых других заболе­ваниях, а также при эффективной гиполипидемической терапии.

Метод определения уровня холестерина липопротеинов высокой плотности (α-холестерина) основан на способности ЛПНП и ЛПОНП в противоположность ЛПВП образовывать нерастворимые комплек­сы с гепарином в присутствие ионов марганца. В надосадочной жидкости определяют содержание холестерина ЛПВП (α -ХС).

Нормальные величины холестерина ЛПВП (α-ХС) равны 0,9- 1,9 ммоль/л.

Коэффициент атерогенности (КА) рассчитывают по следующей формуле:

У здоровых людей в норме он составляет 2-3. Примечания.

1. Кровь для анализа содержания α -ХС берут у обследуемого утром натощак, через 12-14 ч после последнего приема пищи. В течение 2 нед до взятия крови необходимо прекратить использо­вание лекарственных препаратов, влияющих на липидный об­мен. Взятая цельная кровь может храниться при 4 ос не более 3 ч.

2. Для исследования можно применять как сыворотку, так и плазму, полученную с использованием этилендиаминтетрауксус­ной кислоты (ЭДТА) в качестве антикоагулянта (l мг сухой динатриевой соли ЭДТА на 1 мл крови).

Клинико-диагностическое значение α -ХС

Снижение уровня ХС-ЛПВП более четко предсказывает форми­рование ИБС, чем увеличение содержания в плазме (сыворотке) крови общего ХС. Уменьшение концентрации α -ХС всего лишь на 0,13 ммоль/л (с 0,91 ммоль/л до 0,78 ммоль/л) в 3 раза повышает риск заболеваемости ИБС. Значительное уменьшение концентрации α -ХС (до уровня меньше 0,52 ммоль/л) и повышение холестерино­воro коэффициента атерогенности отмечается у лиц с алиментар­ным ожирением, что свидетельствует о риске развития у них ИБС.

Гиподинамия и курение приводят к снижению уровня α -ХС . То же наблюдается при избыточном потреблении сахара. Кон­центрация α -ХС и ЛПВП значительно уменьшается при атеро­склерозе, инфаркте миокарда, сахарном диабете, остром гепати­те, циррозе печени, застойной (обтурационной) желтухе, заболе­ваниях почек, острых бактериальных и вирусных инфекциях. Увеличение концентрации α -ХС отмечено при занятиях физиче­ским трудом (на свежем воздухе), под влиянием эстрогенов, некоторых пестицидов, приема алкоголя.

Триацилглицерины (ТГ) (нейтр жиры) – эфиры трехатомного спирта глицерина и высших жирных кислот. Для их кол опр-ия исп-ют химические и ферментативные (энзимные) методы исследования. Весьма распространены химические методы с колориметрическим и флюориметрическим завершением.

КДЗ: Гипертриацилглицеринемия. Увеличение конц-ии нейтр жиров в крови (до уровня свыше 2,30 ммоль/л) отражает возрастание ур ЛПОНП и ХМ. Для установления содержания ЛПОНП нах-т расч м-дом конц-ю ХС-ЛПОНП: пок-ль конц-ии ТГ (не превыш 3,4 ммоль/л) дел на 2,2, т.к. молярное сод-ие ТГ в лип-ой фазе частиц ЛПОНП превыш в 2,2 раза таковое холестерола. Гипертриацилглицеринемия набл-ся у больных ожирением, хр ИБС, вир гепетитом, алкогольным и билиарным циррозом печени, внепеченочной обтурацией желчных путей, панкреатитами, нефр с., хр поч недостаточностью, гипертонической болезнью, острым инфарктом миокарда, тромбозом сосудов сердца, СД, хр алкоголизмом, подагрой, гликогенозами 1,2,3 типов, бол Дауна, остр перемежающейся порфирией.

Гипотриацилглицеринемия: их ур сниж-ся при гипо- и абеталипопротеинемии, лимфангиэктазии кишечника, терминальной стадии поражения паренхимы печени, ХОБЛ, гипертиреозе, инфаркте мозга, лактозурии, недостаточности питания, синдроме мальабсорбции.

37 Клинико-диагностическое значение определения концентрации билирубина в крови и моче. Паренхиматозная, обтурационная, гемолитическая желтухи. Функциональные гипербилирубинемии.

Пигментный обмен представляет собой совокупность слож­ных превращений различных окрашенных веществ в организме человека и животных .

Наиболее хорошо известный пигмент крови — гемоглобин. Гемоглобин — сложный белок, хромопpoтeин, который состоит из белковой части, глобина, и простетической труппы, представленной че­тырьмя геммами, каждый из к-х состоит из 4 пиррольных ядер, связанных между собой метиновыми мостиками (-СН=). В центре образованного пиррольными ядра­ми порфиринового кольца находится ион двухвалентного железа.

Известно, что средний срок жизни эритроцитов составляет 100-110 сут, по окончании этою периода происходит их разру­шение. Деструкции подвергается и содерж:ащи:йся в эритроцитах гемоглобин. Процесс распада начинается уже в сосудистом русле, а завершается в клеточных элементах системы фaroцитирующих мононуклеаров (купферовских клетках печени, плазмarических клетках костного мозга). После выхода гемоглобина из структуры эритpoцитов так называ­емый внеэритроцитарный гемоглобин связывается с гаптоглоби­ном плазмы, образуя комплекс «гемоглобин-гаптоглобин. Бла­годаря этому гемоrлобин задерживается в сосудистом русле, не проходя через почечный фильтр. Вследствие трипсиноподобноro действия бета-цепи гаптоглобина и вызванных его влиянием конформационных изменений в порфириновом кольце гема соз­даются условия для более легкого разрушения гемоглобина в кле­точных элементах системы фагоцитирующих моноиуклеаров (пе­чени, селезенки, костного моэга и других органов). Вначале происходит разрыв метиновoro мостика между 1 и 2 пиррольныи ядрами порфиринового кольца с одновременным окислением двухвалентного железа в трехваленrное. Образующийся таким образом высокомолекулярный пигмент зевенего цвета вердоглобинпредставляет собой комплекс, состоящий из rлобина, ра­зорванной системы порфиринового кольца и трехвалентного же­леза. Дальнейшие превращения приводят к потере вердоглоби­ном железа и глобина, в результате чего порфириновое кольцо разворачивается в цепь и формируется низкомолекулярный жел­чный пигмент зеленого цвета — биливердин. Почти весь он ферментативным путем восстанавливается в важнейший красно­желтый пигмент желчи — билирубин, являющийся обычным компонентом плазмы крови. При распаде 1 г гемоглобина обра­зуется 34 мг билирубина. Будучи водонерастворимым, свободный билирубин соединяется с альбумином плазмы, который служит основным его транспортером в плазме крови. Установлено, что каждая молекула альбумина реагирует с двумя (или даже тремя) молекулами билирубина, одна из которых связана с белком более прочно, чем дрyгaя(ие) (в физиологических условиях 1 г альбуми­на заключает в себе 17 мг билирубина). При ацидотических сдви­гах в организме, высвобождении в плазму свободных жирных кислот (вследствие активации липолиза), а также под влиянием ряда экзогенных веществ билирубин вытесняется из альбумина плазмы, образуя ассоциаты с коллагеном и липидаии мембран.

Комплекс «альбумин-билирубин», доставленный с током крови в печень, на поверхности плазматической мембраны гепа­тоцита подвергается диссоциации. При этом высвобожденный билирубин образует временный ассоциат с липидами плазмати­ческой мембраны и перемешается через нее благодаря деятель­ности определенных ферментных систем. Дальнейшее прохожде­ние свободного билирубина в клетку происходит при участии в этом процессе двух белков-переносчиков: лигандина (он тран­спортирует основное количество билирубина) и протеина Z.

Лигандин и протеин Z обнаружены также в почках и кишеч­нике, поэтому при недостаточности функции печени они способ­ны компенсировать ослабление процессов детоксикации в этом органе. В клетках печени под влиянием фермента глюкуронил­трансферазы, осуществляющей перенос активных форм молекул глюкуронсвой кислоты (уридиндифосфоглюкуроновой кислоты) на свободный билирубин, образуются билирубиндиглюкурониды (75

80%) и билирубинмоноглюкурониды (25-30%). И те и дру­гие достаточно хорошо растворимы в воде, но лишены способ­ности перемешаться через липидный слой мембраны. За счет свя­зывания билирубина с глюкурсновой кислотой присущая свободному билирубину токсичность в значительной мере теряется. Гидрофобный, липофильный свободный билирубин, легко рас­творяясь в липидах мембраны и проникая вследствие этого в ми­тохондрии, разобщает в них дыхание и окислительное фосфори­лирование, нарушает синтез белка, поток ионов калия через мем­брану клеток и органелл. Это отрицательно сказывается на состо­янии центральной нервной системы, вызывая у больных ряд характерных неврологических симптомов.

В настоящее время под свободным билирубином принято по­нимать неконъюгированный (с глюкурсновой кислотой) билиру­бин, который из-за плохой растворимости в воде дает трудную, непрямую (происходящую лишь после внесения в пробу этилового спирта или другого ускорителя) реакцию с ди­азореактивом Ван ден Берга. Поэтому его раньше именовали «непрямой» билирубин. Билирубинглюкурониды (или связан­ный, конъюгированный билирубин) в отличие от свободного би­лирубина тотчас вступают в реакцию с диазореактивом («пря­мой» билирубин). Следует иметь в виду, что в самой плазме крови билирубин, не конъюгированный с глюкуроновой кислотой, мо­жет быть либо связан с альбумином, либо нет. Последняя фрак­ция (не связанного ни с альбумином, ни с липидами, ни с други­ми компонентами крови билирубина) наиболее токсична. При внутривенном введении ее в организм животного наступает нек­роз печени, сопровождающийся выходом ферментов в кровь; происходят гемолиз эритроцитов, разобщение окисления и фос­форилирования.

Клиницистам хорошо известно токсическое действие высоких концентраций билирубина крови. Оно проявляется пораже­нием центральной нервной системы, возникновением очагов некроза в паренхиматозных органах, подавлением клеточного иммунитета, развитием анемии вследствие гемолиза эритроци­тов. Механизм токсического действия билирубина сводится не только к угнетению процессов окислительного фосфорилирова­ния, но также к снижению потребления кислорода, что способно обусловить повреждение тканей из-за дефицита энергии. Важ­ную роль в этом процессе играет и фотосенсибилизирующее дей­ствие билирубина. Будучи метаболитом протопорфирина — од­ного из наиболее активных фотосенсибилизаторов, билирубин способен, используя квантовую энергию света, переводить хими­чески инертный молекулярный кислород в чрезвычайно актив­ную, синглетную форму. Синглетный кислород разрушает любые биологические структуры, окисляет липиды мембран, нуклеине­вые кислоты, аминокислоты белков. В результате активации им перекисного окисления липидов и отщепления гликопротеинов, а также высокомолекулярных пептидов мембран возникает гемо­лиз эритроцитов. Учитывая способность билирубина иницииро­вать свободнорадикальное окисление липидов, многие авторы рекомендуют включать в комплекс медикаментозной терапии препараты антисксидантнсго действия (альфа-токоферол, аскор­бат, цистамин, ионол и др.), способствующие снижению выра­женности гипербилирубинемии.

Сам так называемый свободный билирубин представлен 4 изомерами (БIХ альфа, БIХ бета, БIХ гамма, БIХ дельта), фрак­ционный состав которых у взрослых и детей различен (у взрослых на долю водонерастворимого изомера БIХ альфа приходится 94% от всех фракций билирубина, у новорожденных — 80%). В плазме крови детей отмечено более высокое, чем у взрослых, содержание водорастворимых фракций билирубина (БIХ бета, БIХ гамма, БIХ дельта). этим объясняется выход свободного билирубина с мочой новорожденных. Конъюгированный билирубин также представлен рядом фракций, в числе которых конъюгированный билирубин, связанный с альбумином, не связанный с альбуми­ном и связанный с фосфолипидaми.

Билирубинглюкурониды благедаря ферментным системам мембран активно перемешаются через них (против градиента концентрации) в желчные ходы, выделяясь вместе с желчью в просвет кишечника. В нем под дейcmиeм ферментов, продуцируемых кишечной микрофлорой, происходит разрыв глюкуронид­ной связи. Высвобожденный свободный билирубин восстанавли­вается с образованием в тонком кишечнике сначала мезобилиру­бина, а затем и мезобилиногена (уробилиногена). В норме опре­деленная часть мезобилиногена, всасываясь в тонком кишечнике и в верхнем отделе толстого, через систему воротной вены попа­дает в печень, где практически полностью разрушается (путем окисления), превращаясь в дипиррольные соединенна.

Мезобилиноген (уробилиноген) при этом в общий ток кровообращения не поступает. Часть его вместе с продуктами разрушения вновь направляется в просвет кишечника в составе желчи (энтерогепатальный круговорот). Однако даже при самых незначительных изменениях в печени ее барьерная функция во многом «снимается и мезобилиноген попадает сначала в общий ток кровообращения, а затем в мочу. Основная же масса его на­правляется из тонкого кишечника в толстый, где под влиянием анаэробной микрофлоры (кишечной палочки и других бактерий) подвергается дальнейшему восстановлению с образованием стер­кобилиногена. Образовавшийся стеркобилиноген (су­точное количество 100-200 мг) почти полностью выделяется с калом. На воздухе он окисляется и превращается в стеркобилин, являющийся одним из пигментов кала. Неболыцая часть стеркобилиногена попадает путем всасывания через слизистую оболоч­ку толстого кишечника в систему нижней полой вены, доставля­ется с кровью в почки и выделяется с мочой.

Таким образом, в моче здорового человека уробилиноген отсутствует, но в ней содержится некоторое ко­лнчество стеркобилина (который часто не совсем правильно на­зывают «уробилином»).

Следовательно, моча здорового человека не содержит мезоби­линоген, но в ней имеется некоторое количество (4 мг в суточном объеме) стеркобилиногена (часто не совсем правильно именуе­мого уробилиногеном). Из-за близости химических структур со­единений раздельное определение мезобилиногена и стеркоби­линогена сопряженсс определенными методическими труднос­тями.

Следует иметь в виду, что у новорожденных из-за стерильнос­ти кишечника билирубин не преврашается в его перечисленные производные (метаболиты), но активно всасывается в кровь, обусловливая гипербилирубинемию.

Для определения содержания билирубина в сыворотке (плаз­ме) крови используют в основном химические и физико-хими­ческие методы исследования, среди которых выделяют колори­метрические, спектрофотометрические (ручные и автоиатизированные), хроматографические, флюориметрические и некоторые другие.

Большинство из них базируется на описанной еще Эрлихом реакции билирубина (мочи) с диазофенилсульфоновой кислотой. Она состоит в возникновении азокрасителя, имеющего розовую окраску в кислой и синюю — в щелочной среде.

Желтуха (icterus) — синдром, возникающий при увеличении содержания в крови билирубина и характеризующийся желтой окраской кожи, слизистых оболочек, склер в результате отложения в них желчных пигментов при нарушении желчеобразования и желчевыделения.

источник

Основан на реакции Либерман‑Бурхарда: в сильно кислой среде в присутствии уксусного ангидрида происходит дегидратация холестерина с образованием окрашенного в зеленовато‑синий цвет бисхолестадиенилмоносульфоновой кислоты.

Сыворотка (указанный метод) 0 ‑ 1 год 1.81‑4.53 ммоль/л
до 20 лет 3.10‑5.80 ммоль/л
20 ‑ 29 3.40‑5.80 ммоль/л
30 ‑ 39 3.70‑6.20 ммоль/л
40 ‑ 49 3.70‑6.80 ммоль/л
50 ‑ 59 4.10‑7.30 ммоль/л
60 ‑ 69 4.20‑7.40 ммоль/л

Свободный и эфирносвязанный холестерин окисляется хлорным железом в присутствии уксусной, серной и фосфорной кислот с образованием ненасыщенных продуктов, окрашенных в фиолето‑красный цвет.

Основан на использовании сопряженных ферментативных реакций, катализируемых: 1) холестеролэстеразой, катализируещей гидролиз эфиров холестерина до свободного холестерина; 2) холестеролоксидазой, катализирующей превращение холестерина в холестенон с образованием перекиси водорода; 3) пероксидазой, катализирующей в присутствии фенола окисление перекисью водорода 4‑аминоантипирина с образованием окрашенного продукта розово‑малинового цвета.

Сыворотка
(указанный метод)
20‑29 лет 3,70‑6,51 ммоль/л
30‑39 лет 4,25‑7,04 ммоль/л
40‑49 лет 4,37‑7,70 ммоль/л
старше 50 лет 4,55‑8,24 ммоль/л
Спинномозговая жидкость 0‑0,013 ммоль/л
Слюна 0,065‑0,233 ммоль/л
Желчь печеночная 2,1‑5,4 ммоль/л
пузырная в среднем 11,1 ммоль/л

Завышение результатов при колориметрических методах исследования происходит при высоком содержании в пробе билирубина, гемоглобина, витамина A; при ферментативном методе — оксикортикостероидов и применении антикоагулянтов (фторидов, оксалатов).

Существенное повышение содержания холестерина отмечается при гиперлипопротеинемии IIa типа (семейная гиперхолестеринемия), IIb и III типа (полигенная гиперхолестеринемия, семейная комбинированная гиперлипидемия), умеренное повышение наблюдается при гиперлипопротеинемии I, IV, V типа, а также заболеваниях печени (внутри‑ и внепеченочный холестаз), заболеваниях почек, злокачественных опухолях поджелудочной железы, гипотиреозе, заболеваниях сердечно‑сосудистой системы, беременности, сахарном диабете.

Снижение выявляется при гипертиреозе, циррозе печени, злокачественных опухолях печени, гипопротеинемии и аb‑липопротеинемии.

Накопление холестерина выявляется при менингите, опухоли или абсцессе мозга, кровоизлияниях в мозг, при рассеяном склерозе.

Снижение значений обнаруживается при церебральной и кортикальной атрофии.

Свободный холестерин способен образовывать с дигитонином, томатином, пиридинсульфатом труднорастворимые соединения. Чаще всего применяют водно‑спиртовый или изопропаноловый раствор дигитонина.

Холестерин экстрагируют из сыворотки с помощью изопропилового спирта, экстракт делят на две части, в одной определяют содержание общего холестерина. В другой порции экстракта свободный холестерин осаждают дигитонином, супернатант отбрасывают, а осадок растворяют и определяют содержание свободного холестерина любым методом. Содержание этерифицированного холестерина рассчитывают как разницу между общим и свободным.

Коэффициент этерификации холестерина является важной функциональной пробой печени. Снижение коэффициента пропорционально снижению функции печени: острый и обострения хронического гепатита, механическая желтуха, цирроз печени. Степень этерификации также зависит от активности сывороточного фермента лецитин-холестерин-ацил-трансферазы, поэтому хранение пробы при комнатной температуре может изменить соотношение между свободной и этерифицированной фракцией холестерина.

Разделение α‑ и β‑липопротеинов основано на избирательной способности липопротеинов очень низкой и низкой плотности образовывать нерастворимые комплексы с гепарином в присутствии двухвалентных катионов Mn2+. Липопротеины высокой плотности при этом остаются в надосадке, где определяют содержание α‑холестерина любым способом.

Определение α‑холестерина используется для расчета индекса атерогенности:

α‑Холестерин
Сыворотка 0,9‑1,9 ммоль/л
Индекс атерогенности
Сыворотка новорожденные Читайте также: Пот пахнет ацетоном: причины, как избавиться

Норма ТГ зависит от возраста человека и измеряется в ммоль/л.

Белки участвуют в транспортировке биологических веществ. Они доставляют не растворимый в воде холестерин во все ткани организма. Норма общего белка составляет 62 – 83 г/л. Изменения показателя в сторону понижения свидетельствуют о заболеваниях печени, поджелудочной железы, онкологии. Повышение данного компонента может говорить об острых инфекциях, онкологии, ревматизме.

Синтезируясь в печени, мочевина выводится почками с мочой. Она создаётся печенью из токсического аммиака. Норма уровня мочевина у взрослого человека от 2,5 до 7,3 ммоль/л. Если концентрация повышена, то дополнительно определяют уровень мочевины в моче. Когда мочевина в моче и крови одновременно имеют высокий уровень, то это свидетельствует о сердечной недостаточности, об инфаркте почки или миокарда, пиелонефрите. Если мочевина в крови и моче снижена, то возможны патологические процессы в печени.

Биохимическое исследование сыворотки крови на холестерин имеет следующие виды:
  • колориметрический;
  • нефелометрический;
  • титрометрический;
  • флюориметрический и другие методы.

Наиболее часто проверка уровня холестерола проводится колориметрическим способом. На этом методе измерения основаны портативные экспресс анализаторы.

Биохимический экспресс анализ крови применяется в том случае, когда необходимо измерить значение холестерина в максимально короткие сроки. Аппарат для получения экспресс результатов позволяет выявить общий показатель и его фракций. Для этого используются тестовые полоски, на которых нанесены специальные реагенты. Аппарат показывает холестерин реакции на мониторе. Экспресс анализ можно проводить самостоятельно. Для этого берут кровь из указательного пальца.

Прокол пальца делают ланцетами, затем наносят на тест-полоску. В состав тест полосок входят реагенты: хромоген, пероксидаза, холестерин-эстераза и холестерин-оксидаза. В процессе реакции глюкооксидаза вступает в химический процесс с холестерином. Высвобожденная энергия преобразуется в значение холестерина. Аппарат показывает уровень холестерина в ммоль/л или г/л.

Расшифровка значений позволяет определить повышение концентрации вещества. У женщин эти показатели до начала менопаузы, как правило, имеют нормальный уровень. Результаты у мужчин отличаются в сторону увеличения. Этим объясняются более частые заболевания сердца и сосудов у мужского пола. Аппарат экспресс анализатора не всегда дает абсолютно точные результаты и имеет некоторые погрешности.

Все виды лабораторных исследований дают максимально точный результат.

Выявление липопротеидов в сыворотке крови основан на реакции их свободных молекул. Для этого метода используются специальные реагенты: серная, уксусная, фосфатная кислоты, хлорное железо. В реагенты вводят сыворотку крови, затем для окисления добавляют хлорное железо. В процессе реакции раствор меняет свой цвет.

Реакции Либермана-Бурхарта основаны на использовании активной кислой среды и молекул холестирола. Реагенты концентрированной серной, ледяной уксусной кислот и уксусного ангидрита вводят в сыворотку куда добавлены реагенты: этиловый спирт, хлороформ. Раствор окрашивается в зелёный цвет.

Когда нужно проверить концентрацию свободного холестерина, то его первоначально выделяют из сыворотки, используя этиловый спирт. Для измерения фракции ЛПНП и свободного холестерина берут реагенты дигитонин, томатин, пиридинсульфат. В процессе реакции холестерин оседает в пробирке и по этому веществу определяют уровень ЛПНП.

По анализу на общее содержание холестерина нельзя судить о состоянии здоровья человека. Лабораторные исследования на общий показатель складываются из суммарного содержания hdl, ldl, триглециридов, ЛПОНП. Расшифровка измерения определяет их количественный состав. Повышение показателей общего значения может возникнуть по причине наследственного фактора. И если человек с генетической предрасположенностью к гиперхолестеринемие употребляет большое количество животных жиров, то вероятность развития атеросклероза у него увеличивается.

ЛПНП – соединения белков с холестерином. Они доставляют его ко всем тканям организма. Повышение уровня ЛПНП приводит к образованию бляшек, развитию атеросклероза. Образованные склеротические образования уменьшают просвет, тем самым ухудшая кровоток в сосуде. Для исследования используют колометрический метод. Кровь для получения биоматериала забирают из вены. Чтобы получить точный результат анализа необходимо соблюдать обязательные условия:

  • обследование делается строго на голодный желудок, приём пищи должен быть за 12 часов до исследования;
  • нельзя курить в течение 1 часа до сдачи крови.

Цель исследования состоит в определении вероятности атеросклероза и риска ИБС (ишемической болезни сердца). Тест назначают во время профилактического осмотра и в случае повышенной концентрации общего уровня. ЛПНП у женщин и мужчин отличаются.

Таблица 1. Липопротеины низкой плотности

Норма ldl, ммоль/л у мужчин у женщин 40-49 2,3 – 5,3 2,1 – 4,9 50-59 2,3 – 5,3 2,3 – 5,7 60-69 2,3 – 5,6 2,6 – 6,1 Старше 70 2,3 – 5,0 2,5 – 5,6
Источник: technohouse-market.ru
Читайте также
Вид: